玉米赤霉醇酶联免疫试剂盒使用说明书
www.xbxmw.com 2007-7-12 19:51:11 来源:中国兽医药品监察所 阅读:次
一、概要
玉米赤霉醇(zeranol,ZER),属于雷索酸内酯类非甾体同化激素。ZER作为牛羊促生长剂,以耳根埋植的形式应用,促进蛋白质的合成,能提高胴体瘦肉率及饲料转化率。但是,玉米赤霉醇具有弱雌激素作用,在动物尿液中的残留会引起人体性机能紊乱及影响第二性征的正常发育,在外部条件诱导下,还可能致癌。ZER排出动物体外后,还可经饮水和食物造成二次污染及环境污染。1998年欧盟禁止将玉米赤霉醇等激素类药物应用于畜禽养殖,我国农业部第235号公告明确规定玉米赤霉醇禁用于所有食品动物,所有可食动物尿液不得检出。我国尚未制订动物性食品中玉米赤霉醇残留检测的行业标准。由于玉米赤霉醇作为牛羊增重剂效果好,经济回报高,仍有违法使用的现象。目前国际上动物性食品中玉米赤霉醇残留仪器检测方法主要有液-质联机和气-质联机法,但这两种仪器方法前处理复杂,检测时间长,需要昂贵的仪器设备。酶联免疫快速检测法(ELISA)具有灵敏度高,特异性强,仪器化程度低和样品前处理相对简单等优点,特别适于玉米赤霉醇现场监控和大量样本筛查。
二、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在微孔条上预包被偶联抗原,样本中的残留物玉米赤霉醇将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争玉米赤霉醇抗体,加入酶标二抗后,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含残留物玉米赤霉醇的含量成负相关,与标准曲线比较即可得出相应残留物玉米赤霉醇的含量。
三、使用范围
用于定量、定性检测牛尿中玉米赤霉醇的残留量。
四、交叉反应率
α-玉米赤霉醇 ………………………100.0%
β-玉米赤霉醇 ………………………36.3%
α-玉米赤霉烯醇………………………52.7%
β-玉米赤霉烯醇………………………0.7%
玉米赤霉酮 ………………………74.4%
玉米赤霉烯酮的………………………53.7%;
与己烯雌酚 ………………………<0.1%
雌二醇 ………………………<0.1%
睾酮……………………………………<0.1%、
克伦特罗………………………………<0.1%。
五、试剂盒组成
每一个盒中的试剂足够进行96个测量(包括标准分析孔),盒中的材料如下:
1. ZER 96孔板酶标板 1块
2. 标准液6瓶,1ml/瓶,为ZER标准溶液:0µg/L、0.5µg/L、1µg/L、2.5µg/L、5µg/L、10µg/L
3. 酶标记物12ml………………………………………………红色帽
4. 玉米赤霉醇抗体 7ml……………………………………… 绿色帽
5. 显色液 A液 7ml……………………………………………白色帽
6. 显色液 B液 7ml……………………………………………红色帽
7. 终止液(7ml):2M硫酸 …………………………………黄色帽
8. 20X浓缩洗涤液40ml
9. 2X浓缩复溶液40ml
六、所需仪器试剂材料
1. 仪器
微孔板酶标仪(配备450nm和630nm滤光片)。
微量振荡器
离心机:转速应满足6000转/分。
微量移液器:单道20ml、50ml、100ml、1000ml;多道250µl。
天平:感量0.01g。
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