氯霉素酶联免疫试剂盒使用说明书
www.xbxmw.com 2007-7-12 19:52:39 来源：中国兽医药品监察所 阅读：次
一、概要
氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是应用广泛的抗菌素，曾对畜禽疾病控制和治疗起到了重要作用。但由于氯霉素存在严重的副作用，能引起人的再生性障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。我国农业部第235号文规定动物性食品中氯霉素残留限量为不得检出。由于气相色谱等仪器分析方法样本前处理及测定操作烦琐和费用高，推广使用受到限制。ELISA方法具有灵敏度高，特异性强，仪器化程度低和样本前处理相对简单等优点，适于现场监控和大量样本筛查。
二、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被偶联抗原，样本中的残留物氯霉素将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争氯霉素抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应残留物氯霉素的含量。
三、使用范围
用于定量、定性检测鸡组织（肌肉、肝脏等）、虾、蜂蜜中氯霉素的残留量。
四、交叉反应率
氯霉素……………………………100%
棕榈氯霉素 ……………………＜0.1%
甲砜氯霉素………………………＜0.1%
氟甲砜霉素………………………＜0.1%
已酰氯霉素………………………＜0.1%
五、试剂盒的组成
每一个盒中的试剂足够进行96个测量（包括标准分析孔），盒中的材料如下：
1. 氯霉素96孔酶标板 1块
2. 标准液6瓶，1mL/瓶，为CAP标准溶液： 0µg/L、0.05µg/L、0.15µg/L、0.45µg/L、1.35µg/L、 4.05µg/L
3. 酶标记物12mL………………………………………………红色帽
4. 氯霉素浓缩抗体 0.8mL…………………………………… 绿色帽
5. 显色液 A液 7mL……………………………………………白色帽
6. 显色液 B液 7mL……………………………………………红色帽
7. 终止液（2M硫酸）7mL …………………………………黄色帽
8. 20X浓缩洗涤液40mL ………………………………………透明帽
9. 2X浓缩复溶液50mL ………………………………………透明帽
六、所用仪器、试剂
1. 仪器：
微孔板酶标仪450/630nm
旋转蒸发仪
组织均质器
振荡器
离心机
20mL-200mL、200mL-1000mL微量加样器
2. 试剂：
乙酸乙酯
乙腈
正己烷
三氯甲烷
蒸馏水
七、溶液的配制
1. 稀释复溶液：将2X浓缩复溶液摇匀，用水以1：2比例稀释，临用前配制。
2. 稀释洗涤液：将20X浓缩洗涤液摇匀，用水以1：20比例稀释，临用前配制。
3. 稀释抗体溶液：将11X浓缩抗体溶液摇匀，用复溶液将浓缩抗体按1:11比例稀释，临用前配制。
八、样本前处理步骤
1．鸡组织（肌肉、肝脏等）、虾样本处理方法
1.1 称3g±0.1g均质后的样品于离心管中，加入6mL乙酸乙酯，振荡10min，室温3000g以上，离心10min。
1.2 取出4mL上层液体（相当于2g的样品）在50~60℃氮气流下干燥。
1.3
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