禽流感、新城疫重组二联活疫苗(rL—H5株)质量标准
www.xbxmw.com 2007-8-17 18:14:04 来源： 阅读：次
禽流感、新城疫重组二联活疫苗(rL—H5株)
Qinliugan Xinchengyi Chongzu Erlian Huoyimiao(rL-H5 Zhu)
Avian Influenza and Newcastle Disease Recombinant Vaccine，Live(rL—H5 Strain)
本品系用表达H5亚型禽流感病毒HA基因的重组新城疫病毒rLa Sota—H5mutHA(rL—H5)株接种SPF鸡胚培养，收获感染鸡胚尿囊液，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。用于预防鸡的H5亚型禽流感和新城疫。
【性状】 微黄色海绵状疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。
【无菌检验】 按《中华人民共和国兽药典》进行，应无菌生长；如有菌生长，应进行杂菌计数，并作病原性鉴定和禽沙门氏菌检验，应符合规定。每羽份疫苗含非病原菌应不超过1个。
【鉴别检验】 将疫苗用灭菌生理盐水稀释至103.0EID50，与10倍稀释并经56℃30分钟灭活的抗鸡新城疫病毒单因子高免血清等量混合，在24～30℃中和1小时，尿囊腔内接种10日龄SPF鸡胚10枚，每胚0．2ml，置37℃观察120小时。应不引起特异性死亡及病变，并应至少有8个鸡胚健活，鸡胚尿囊液作红细胞凝集试验，应为阴性。
同时按附注方法进行H5亚型禽流感HA抗原蛋白表达的免疫荧光检测，结果应符合规定。
【外源病毒检验】 按《中华人民共和国兽药典》附录进行，应符合规定。
【安全检验】将疫苗用生理盐水作适当稀释，滴鼻接种2～7日龄SPF鸡10只，每只0．05m1(含10羽份)，连同对照鸡10只，观察14目，应无异常反应。如有非特异性死亡，免疫组与对照组均不应超过1只。
【效力检验】
鸡新城疫部分 下列方法任择其一。
(1)用鸡胚检验 按瓶签注明羽份，将疫苗用无菌生理盐水稀释至每lml含l羽份，再进
行lO倍系列稀释，取3个适宜稀释度，分别尿囊腔内接种lO日龄SPF鸡胚5枚，每胚0．1ml，
置37℃继续孵育120小时。48小时内死亡的鸡胚弃去不计，在48～120小时内死亡的鸡胚，随时取出，收获鸡胚液，将同一稀释度的鸡胚液等量混合，分别测定红细胞凝集价。至120小时，取出所有活胚，逐个收获鸡胚液，分别测定红细胞凝集价。凝集价不低于1：160(微量法l：128)者判为感染，计算EID50每羽份病毒含量应不低于106.0EID50。
(2)用鸡检验 用30～60日龄SPF鸡13只，10只各滴鼻接种疫苗0．0l羽份，另3只作
对照。接种后14日，每只鸡各肌肉注射鸡新城疫病毒强毒北京株(CVCC AVl611株)105.0ELD50。观察14日。对照鸡应全部发病死亡，免疫鸡应至少保护9只。
H5亚型禽流感部分 采用血清学方法进行检验，结果不符合规定时，可采用免疫攻毒法进行检验。
(1)血清学方法 用l～2月龄SPF鸡10只，每只滴鼻接种疫苗0．05m1(含1／10羽份)，接种后3周，连同对照鸡5只，分别采血，分离血清，用禽流感病毒H5亚型抗原测定血凝抑制(HI)抗体。对照鸡HI抗体全部阴性(HI≤1：2)，免疫鸡HI抗体几何平均滴度(GMT)≥4Iog2，且7／10以上HI抗体滴度大于4log2。
